黑枸杞是生长在荒漠戈壁等特殊地域的茄科枸杞属植物,因具有护眼明目、美容养颜、免疫调节、延缓衰老、改善血液循环、预防动脉硬化等多种功效而享有“软黄金”的美誉。
红枸杞富含枸杞多糖、维生素、矿物质、β-胡萝卜素等多种营养成分,能明显提高机体的超氧化歧化酶( SOD) 的活性,可对抗自由基过氧化,有利于活性氧的清除,从而有助于延缓衰老和抗疲劳。
黑枸杞作为纯天然野生植物,富含游离氨基酸、矿物质、生物碱、维生素等多种人体必需的营养元素。黑枸杞的游离氨基酸及多种微量元素含量远远高于红枸杞,更利于调节机体免疫功能。此外,黑枸杞含有大量的花青素,这是红枸杞所不具备的。
花青素是目前发现的最有效的天然抗氧化剂,与维生素 C 相比具有更强的清除自由基的能力。黑枸杞中的花青素、多酚、多糖等活性成分能够延缓人体细胞组织衰老,清除氧自由基,保持机体的年轻状态,增强免疫力,延年益寿。黑枸杞的功效逐渐得到人们的关注。与红枸杞相比,黑枸杞具有更大的研究价值和更广阔的市场前景。
本试验不仅证实了与红枸杞提取物相比黑枸杞提取物具有更大的清除自由基的作用,还将水提、醇提与超声波技术相结合对黑枸杞活性成分进行充分提取,为黑枸杞在食品、保健品及化妆品等领域的应用提供参考。
1 材料
1. 1 主要材料
黑枸杞干、红枸杞干( 青海) ,无水乙醇( 南京化学试剂股份有限公司) ,DPPH( 美国 Sigma) 。
1. 2 仪器
超声波清洗机 ( 上海精密科学仪器有限公司) ,真空冷冻干燥机( 上海利闻科学仪器有限公司) ,紫外可见分光光度计( 尤尼柯〈上海〉仪器有限公司) ,高速冷冻离心机( 上海卢湘仪离心机仪器有限公司) ,粉碎机( 浙江新世纪粉碎设备有限公司) 。
2 方法
2. 1 黑枸杞、红枸杞水提取物制备
制备黑枸杞、红枸杞水提取物的流程如图 1所示。
黑枸杞干/红枸杞干→粉碎→蒸馏水→重复提取三次→合并提取物→离心→取上清液→冷冻干燥→黑枸杞/红枸杞水提取物
2. 2 黑枸杞、红枸杞超声波-水提取物制备
制备黑枸杞、红枸杞超声波-水提取物的流程如图 2 所示。
图 2 黑枸杞、红枸杞超声波-水提取物制备流程
2. 3 黑枸杞、红枸杞醇提取物制备
制备黑枸杞、红枸杞醇提取物的流程如图 3所示。
黑枸杞干/红枸杞干→粉碎→无水乙醇→重复提取三次→合并提取物→离心→取上清液→冷冻干燥→黑枸杞/红枸杞醇提取物
图 3 黑枸杞、红枸杞醇提取物制备流程
2. 4 黑枸杞、红枸杞超声波-醇提取物制备
制备黑枸杞、红枸杞超声波-醇提取物的流程如图 4 所示。
图 4 黑枸杞、红枸杞超声波-醇提取物制备流程
2. 5 DPPH 自由基清除试验
将称量的 DPPH 粉末用无水乙醇溶解后定容,配制 DPPH 溶液并避光保存。将黑枸杞与红枸杞各组提取物分别配制成 0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0 mg /mL的溶液,取各浓度样品溶液 2. 0 mL,分别加入2 mLDPPH 溶液,避光放置 30 min,以 2 mL 无水乙醇代替 DPPH 溶液作为空白组,对照组用等体积的蒸馏水代替样品,用紫外分光光度计在 517 nm 处测定吸光值,按公式计算 DPPH 自由基清除率。
清除率( % ) = { 1 - [( Ai - Aj ) /A0]} × 100%
3 结果与分析
3. 1 水提取物对 DPPH 自由基清除能力的影响
对不同浓度的黑枸杞水提取物和红枸杞水提取物进行 DPPH 自由基清除能力的比较,结果如图5 所示。黑枸杞水提取物从低浓度开始就具有良好的自由基清除能力,而红枸杞水提取物浓度低时自由基清除能力很低,当提取物浓度达到 1 mg /mL 时清除能力仍远远低于黑枸杞水提取物。
3. 2 醇提取物对 DPPH 自由基清除能力的影响
对不同浓度的黑枸杞醇提取物和红枸杞醇提取物进行 DPPH 自由基清除能力的比较,结果如图6 所示。红枸杞醇提取物浓度升高对自由基清除能力无显著影响,而黑枸杞醇提取物自由基清除能力显著高于红枸杞醇提取物,且最高可达 55% 。
3. 3 超声波-水提取物、超声波-醇提取物对DPPH自由基清除能力的影响
用超声波技术作为辅助技术联合水提取法、醇提取法分别提取黑枸杞、红枸杞中的活性成分,并在比较 DPPH 自由基清除能力的基础上,进一步比较用不同提取方法得到的提取物的抗氧化能力。
由图 7 可知,红枸杞超声波-水提取物及超声波-醇提取物的自由基清除能力均显著低于黑枸杞提取物,红枸杞提取物浓度提高对自由基清除能力影响不大,但在一定范围内,黑枸杞提取物对 DPPH 自由基清除能力的影响比较大,清除能力随着浓度的提高而增强。
将几种提取物按清除能力从大到小排序,依次为: 黑枸杞超声波-水提取物 > 黑枸杞超声波-醇提取物 > 红枸杞超声波-水提取物 > 红枸杞超声波-醇提取物。黑枸杞超声波-水提取物的自由基清除能力最强,高达 87. 6% 。
4 结论
就红枸杞而言,起抗氧化作用的主要成分是枸杞多糖、β-胡萝卜素等。
就黑枸杞而言,起抗氧化作用的主要成分是花青素。花青素还具有预防心血管疾病、动脉硬化等作用。红枸杞不含花青素成分,黑枸杞是目前自然界花青素含量最高的果实。
与红枸杞相比,黑枸杞含有更多生物碱及微量元素。通过 DPPH 自由基清除能力实验可以看出,与红枸杞提取物相比,黑枸杞提取物具有更好的抗氧化、清除自由基、延缓衰老的功效。利用黑枸杞开发化妆品、药品、保健品等,具有广阔的前景。
来源:《黑枸杞提取物与红枸杞提取物抗氧化效果的比较》 杨丰绮,胡铁军等
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